ICS07.060 CCSA45 中华人民共和国海洋行业标准 HY/T0347—2022 海水中痕量铵盐的测定 流动分析-邻苯二甲醛固相萃取-荧光 光度法 Determinationofseawatertraceammonium—Flowanalysis, solidphaseextractionando-phthaldialdehydefluorescencedetection 2022-09-26发布 2023-01-01实施 中华人民共和国自然资源部发布 中国标准出版社出版目 次 前言 Ⅰ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 方法原理 1 ………………………………………………………………………………………………… 5 干扰和消除 2 ……………………………………………………………………………………………… 6 试剂与材料 2 ……………………………………………………………………………………………… 7 仪器和设备 3 ……………………………………………………………………………………………… 8 样品采集与保存 4 ………………………………………………………………………………………… 9 分析步骤 4 ………………………………………………………………………………………………… 10 结果计算与记录 5 ………………………………………………………………………………………… 11 精密度和准确度 6 ………………………………………………………………………………………… 12 质量保证和质量控制 6 …………………………………………………………………………………… 13 注意事项 6 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(资料性) 海水中痕量铵盐的测定分析记录 8 …………………………………………………… 附录B(规范性) 海水中痕量铵盐测定的质量控制要求 9 ……………………………………………… 参考文献 10 ……………………………………………………………………………………………………HY/T0347—2022前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国自然资源部提出。 本文件由全国海洋标准化技术委员会(SAC/TC283)归口。 本文件起草单位:自然资源部第三海洋研究所、自然资源部第二海洋研究所、厦门大学。 本文件主要起草人:张元标、朱勇、袁东星、林辉、杨志。 ⅠHY/T0347—2022海水中痕量铵盐的测定 流动分析-邻苯二甲醛固相萃取-荧光光度法 1 范围 本文件描述了采用流动分析-邻苯二甲醛固相萃取-荧光光度法测定海水中痕量铵盐的方法原理、 分析步骤和结果计算与记录,规定了干扰和消除、试剂与材料、仪器和设备、样品采集与保存、结果计算 与记录、精密度和准确度、质量保证和质量控制等的技术要求。 本文件适用于海水中纳摩尔每升(nmol/L)级别痕量铵盐的测定。样品富集体积为10mL时,本 方法的检出限为9nmol/L,测定下限为15nmol/L。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T12763.4 海洋调查规范 第4部分:海水化学要素调查 GB17378.2 海洋监测规范 第2部分:数据处理与分析质量控制 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法原理 4.1 流动分析系统工作原理 样品与试剂在蠕动泵的推动下进入分析模块,在密闭的管道中按设定的顺序和比例进行混合、反 应、固相萃取、洗脱,洗脱液进入荧光检测器测定荧光强度,计算样品中被测物质的含量。 4.2 化学反应原理 在碱性介质中,海水样品中的铵盐与邻苯二甲醛、亚硫酸盐发生衍生化反应,生成具有荧光性质的 异吲哚衍生物,该衍生物富集在固相萃取小柱上,经乙醇洗脱后,用荧光检测器在365nm激发波长、 425nm发射波长下测定。 参考分析流路图见图1。 1HY/T0347—2022 标引符号说明: P1———蠕动泵1; P2———蠕动泵2; C1———混合盘管1,80cm; C2———混合盘管2,80cm; C3———混合盘管3,80cm; L———10mL定量环; E———固相萃取小柱(见6.22);WB———65℃水浴; V1———六通阀1; V2———六通阀2; V3———多位选择阀; D———荧光检测器; R1———邻苯二甲醛溶液(见6.11);R2———亚硫酸钠溶液(见6.12); R3———四硼酸钠缓冲溶液(见6.13); R4———洗脱液(见6.14); R5———超纯水; S———样品; W———废液。 图1 流动分析-邻苯二甲醛固相萃取-荧光光度法测定痕量铵盐的分析流路图 5 干扰和消除 为防止空气中的氨气及颗粒物对试剂的干扰和污染,需增加试剂保护柱,试剂保护柱由一次性注射 器改装而成。去除5mL一次性注射器的活塞和针头,在空筒内填充3mL酸化硅胶(见6.21),即制成 试剂保护柱。在试剂瓶瓶盖上打孔,其大小以能够套紧注射器空筒的乳头为宜;将乳头即整支试剂保护 柱固定在试剂瓶瓶盖上。 6 试剂与材料 除非另有说明,在分析中均使用确认为分析纯的化学试剂,实验用水均为新制备的超纯水(电阻率 大于或等于18.0MΩ·cm)。 6.1 邻苯二甲醛(C8H6O2)。 6.2 甲醇(CH3OH):色谱纯。 6.3 无水亚硫酸钠(Na2SO3)。 6.4 甲醛(HCHO):优级纯。 6.5 十水合四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O)。 6.6 95%(体积分数)乙醇(C2H5OH)。 6.7 硫酸(H2SO4):优级纯,ρ(H2SO4)=1.84g/mL。 6.8 盐酸(HCl):优级纯,ρ(HCl)=1.19g/mL。 2HY/T0347—20226.9 氯化铵(NH4Cl):优级纯,在100℃±5℃下烘干并恒重后,保存在干燥器中。 6.10 硅胶(200目)。 6.11 邻苯二甲醛溶液:c(C8H6O2)=3mmol/L。配制方法为:称取3.35g邻苯二甲醛(见6.1)溶于 200mL甲醇(见6.2)中,用水稀释至1L,得到邻苯二甲醛溶液浓度为25mmol/L。该溶液贮存于高密 度聚乙烯瓶中,在4℃下保存,可稳定1个月。临用时用水稀释至3mmol/L。 6.12 亚硫酸钠溶液:c(Na2SO3)=0.8mmol/L。配制方法为:称取1.26g无水亚硫酸钠(见6.3)溶于 水中,并定容至1L,加入0.2mL甲醛(见6.4),得到亚硫酸钠溶液浓度为10mmol/L。该溶液贮存于 高密度聚乙烯瓶中,在4℃下保存,可稳定1个月。临用时用水稀释至0.8mmol/L。 6.13 四硼酸钠缓冲溶液:ρ(Na2B4O7)=15g/L。配制方法为:称取15g十水合四硼酸钠(见6.5)溶于 水中,并定容至1L。该溶液贮存于高密度聚乙烯瓶中,在4℃下保存,可稳定1个月。 6.14 洗脱液:95%(体积分数)乙醇(见6.6),使用前用超声波脱气10min。 6.15 硫酸溶液:c(H2SO4)=6mol/L。配制方法为:量取300mL硫酸(见6.7),在不断搅拌下缓缓加 入600mL水中。 6.16 盐酸溶液:c(HCl)=1mol/L。配制方法为:量取50mL盐酸(见6.8)与550mL水混合均匀。 6.17 铵盐标准贮备液:c(NH4Cl)=10.00mmol/L。配制方法为:准确称取0.3304g氯化铵(见6.9) 溶于水中,并定容至500mL,贮存于高密度聚乙烯瓶中,在4℃下保存,可稳定1个月。 6.18 铵盐标准中间溶液:c(NH4Cl)=100.00μmol/L。配制方法为:准确量取1.00mL铵盐标准贮备 液(见6.17),用水定容至100mL,贮存于高密度聚乙烯瓶中,在4℃下保存,可稳定7d。 6.19 铵盐标准使用溶液:c(NH4Cl)=1.00μmol/L。配制方法为:准确量取1.00mL铵盐标准中间溶 液(见6.18),用水定容至100mL,现用现配。 6.20 低铵海水:取采集于寡营养盐海域的海水作为低铵海水,常温密封保存,其铵盐浓度应低于本方 法的检出限。 6.21 酸化硅胶。配制方法为:称取200g硅胶(见6.10)在70℃下烘干过夜,加入50mL硫酸溶液(见 6.15),搅拌混匀。 6.22 固相萃取小柱(OasisHLB小柱):6cm3/200mg。 6.23 蠕动泵泵管。试剂泵管内径0.89mm,样品泵管内径2.06mm。 6.24 聚四氟乙烯管。流路管道和混合盘管内径0.75mm,进样管和反应盘管内径1.5mm。 7 仪器和设备 7.1 商品化或实验室自制的流动分析装置,参见图1,主要由下列各部分组成: ———蠕动泵; ———多位选择阀; ———六通阀; ———流动分析用荧光检测器; ———数据处理及仪器控制软件。 7.2 恒温水浴装