(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211224757.X (22)申请日 2022.10.09 (71)申请人 广东一方制药有限公司 地址 528244 广东省佛山市南海区里 水镇 旗峰工业 开发区 (72)发明人 何嘉莹　潘礼业　邱韵静　宋叶　 刘晓琳　刘潇晗　陈向东　林晗　 魏梅　沈斌斌　 (74)专利代理 机构 华进联合专利商标代理有限 公司 44224 专利代理师 苏婕 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 黄荆子的特征图谱构建、 检测以及与蔓荆子 的鉴别方法 (57)摘要 本发明提供了一种黄荆子的特征图谱构建 方法， 包括如下步骤： 取原儿茶酸对照品、 4 ‑羟基 苯甲酸对照品、 异荭草苷对照品、 荭草苷对照品 与穗花牡荆苷对照品， 制备混合对照品溶液； 取 黄荆子样品， 制备供试品溶液； 分别将所述混合 对照品溶液与所述供试品溶液进行超高效液相 色谱分析， 构建黄荆子的特征图谱； 其中， 超高效 液相色谱分析的条件包括： 流动相A为乙腈， 流动 相B为磷酸水溶液； 采用梯度洗脱。 其具有耗时 短、 操作简单、 图谱信息丰富、 特征性强并且重 现 性好的优势， 且同时适用于黄荆子药材、 标准汤 剂与配方颗粒。 权利要求书2页 说明书13页 附图7页 CN 115524423 A 2022.12.27 CN 115524423 A 1.一种黄荆子的特 征图谱构建方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 取原儿茶酸对照品、 4 ‑羟基苯甲酸对照品、 异荭草苷对照品、 荭草苷对照品与穗花牡荆 苷对照品， 制备混合对照品溶 液； 取黄荆子样品， 制备 供试品溶液； 分别将所述混合对照品溶液与所述供试品溶液进行超高效液相色谱分析， 构建黄荆子 的特征图谱； 其中， 超高效液相色谱分析的条件包括： 流动相A为乙腈， 流动相B为磷酸水溶液； 采用 梯度洗脱； 所述梯度洗脱的程序为： 0min～15 min， 流动相A的体积百分数从7％变化至17％； 15min～2 0min， 流动相A的体积百分数由17％变化至19％； 20min～22min， 流动相A的体积百 分数由19％变化至90％； 2 2min～30min， 流动相A的体积百分数保持为90％。 2.根据权利要求1所述的黄荆子的特征图谱构建方法， 其特征在于， 所述磷酸水溶液 中， 磷酸的体积分数为0.0 5％～0.3％。 3.根据权利要求1所述的黄荆子的特征图谱构建方法， 其特征在于， 超高效液相色谱分 析的条件还包括： 色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱； 柱温为28℃～32℃； 流速为0.28mL/ min～0.32mL/mi n； 波长为240nm～ 280nm。 4.根据权利要求1所述的黄荆子的特征图谱构建方法， 其特征在于， 制备混合对照品溶 液包括如下步骤： 将所述原儿茶酸对照品、 所述4 ‑羟基苯甲酸对照品、 所述异荭草苷对照品、 所述荭草苷 对照品、 所述 穗花牡荆苷对照品与6 0％～80％乙醇 混合。 5.根据权利要求1所述的黄荆子的特征图谱构建方法， 其特征在于， 制备供试品溶液包 括如下步骤： 将所述黄荆子样品与含醇溶 液混合， 超声提取， 然后过 滤， 取滤液。 6.根据权利要求1～5任一项所述的黄荆子的特征图谱构建方法， 其特征在于， 所述黄 荆子样品选自黄荆子药 材、 黄荆子标准汤 剂或黄荆子配方颗粒。 7.一种黄荆子的检测方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 取黄荆子样品， 制备待测溶 液； 将所述待测溶 液进行超高效液相色谱分析； 其中， 超高效液相色谱分析的条件包括： 流动相A为乙腈， 流动相B为磷酸水溶液； 采用 梯度洗脱； 所述梯度洗脱的程序为： 0min～15 min， 流动相A的体积百分数从7％变化至17％； 15min～2 0min， 流动相A的体积百分数由17％变化至19％； 20min～22min， 流动相A的体积百 分数由19％变化至90％； 2 2min～30min， 流动相A的体积百分数保持为90％。 8.根据权利要求7所述的黄荆子的检测方法， 其特征在于， 所述磷酸水溶液中， 磷酸的 体积分数为0.0 5％～0.3％。 9.根据权利要求7所述的黄荆子的检测方法， 其特征在于， 超高效液相色谱分析的条件 还包括： 色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱； 柱温为28℃～32℃； 流速为0.28mL/min～ 0.32mL/mi n； 波长为240nm～ 280nm。 10.一种黄荆子与蔓荆子的鉴别方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 取待测物， 进行超高效液相色谱分析， 将获得的所述待测物的图谱与权利要求1～6任 一项所述的黄荆子的特 征图谱构建方法所构建的特 征图谱进行比较；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115524423 A 2其中， 超高效液相色谱分析的条件包括： 流动相A为乙腈， 流动相B为磷酸水溶液； 采用 梯度洗脱； 所述梯度洗脱的程序为： 0min～15 min， 流动相A的体积百分数从7％变化至17％； 15min～2 0min， 流动相A的体积百分数由17％变化至19％； 20min～22min， 流动相A的体积百 分数由19％变化至90％； 2 2min～30min， 流动相A的体积百分数保持为90％。 11.根据权利要求10所述的黄荆子与蔓荆子的鉴别方法， 其特征在于， 所述磷酸水溶液 中， 磷酸的体积分数为0.0 5％～0.3％。 12.根据权利要求10所述的黄荆子与蔓荆子的鉴别方法， 其特征在于， 超高效液相色谱 分析的条件还包括： 色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱； 柱温为28℃～32℃； 流速为 0.28mL/mi n～0.32mL/mi n； 波长为240nm～ 280nm。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115524423 A 3