(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211213241.5 (22)申请日 2022.09.30 (71)申请人 江苏集萃新型 药物制剂技 术研究所 有限公司 地址 210032 江苏省南京市江北新区星火 路10号人才大厦C座10楼 (72)发明人 全丹毅　郑艳萍　 (74)专利代理 机构 江苏华进联源知识产权代理 有限公司 32685 专利代理师 刘伟伟 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 霍山石斛多组分定量的检测方法 (57)摘要 本发明涉及一种霍山石斛多组分定量的检 测方法， 属于中成药生产技术领域， 首先分别制 备标准样品溶液和混合对照品溶液， 接着将标准 样品溶液和混合对照品溶液注入高效液相色谱 仪， 通过实验筛选出最佳流动相组成、 梯度洗脱 程序、 流速、 检测波长、 色谱柱等分析条件， 进行 数据测定并记录色谱图。 根据保留时间进行霍山 石斛样品的各组分定性， 根据峰面积进行霍山石 斛样品的各 组分定量。 本发明提出的检测方法操 作便捷， 能够全面、 客观、 准确的检测和评价霍山 石斛质量。 权利要求书2页 说明书8页 附图1页 CN 115508472 A 2022.12.23 CN 115508472 A 1.一种霍山石斛多组分定量的检测方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 制备标准样品溶液： 取霍山石斛粉末， 加入甲醇溶解， 超声， 微孔滤膜过滤， 得标准霍山 石斛样品溶 液； 制备对照品溶液： 取柚皮素、 石斛酚、 香草酸、 阿魏酸、 牡荆素葡萄糖苷、 夏佛 塔苷、 滨蒿 内酯、 黄芩素、 芦丁、 异夏佛塔苷、 丁香酸和芹菜素适量， 精密称定， 加入甲醇溶解后制成混 合对照品溶 液； 测定高效液相色谱： 分别吸取标准样品溶液及对照品溶液， 注入高效液相色谱仪， 记录 色谱图； 计算样品组分含量： 根据标准样品和对照品的保留时间进行样品溶液的各组分定性， 根据峰面积进行样品溶 液的各组分定量。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其特 征在于， 所述甲醇纯度为80％。 3.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述超声功率为120～ 170W， 频率18～ 22kHz。 4.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱仪测定条件是： 色 谱柱： YMC‑Triart C18 ExRS， 150×4.6mm， 3 μm， 8nm。 5.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱仪测定的柱温是40 ℃。 6.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱仪测定的流速为 1.0mL/mi n， 进样量 为10 μL。 7.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱仪测定的流动相为 乙腈和0.085％磷酸水 溶液， 进行梯度洗脱。 8.根据权利要求 4中的检测方法， 其特 征在于， 所述梯度洗脱过程如下： 9.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱仪使用的检测器为 二极管阵列检测器(DAD)， 进行210～80 0nm全波长扫面， 检测波长： 280nm、 340nm和3 54nm。 10.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述计算样品组分含量的步骤为： 精权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115508472 A 2密吸取混合对照品溶液各1、 2、 4、 8、 10、 15、 20 μL进样， 测定保留时间和峰面积， 以对照品浓 度( μg/mL)为横坐标， 峰面积为 纵坐标， 绘制标准曲线， 计算线性回归 方程， 将标准样品溶液 测得的各峰面积带入线性回归方程中即得 标准样品溶 液中的各组分含量。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115508472 A 3