(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211183651.X (22)申请日 2022.09.27 (71)申请人 江苏丘陵地区镇江农业科 学研究所 地址 212400 江苏省镇江市句容市弘景路1 号 (72)发明人 吴琴燕　庄义庆　梁红芳　 (74)专利代理 机构 南京华恒专利代理事务所 (普通合伙) 32335 专利代理师 高春涛 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 同时测定多种真菌毒素的方法及其应用 (57)摘要 本发明的同时测定多种真菌毒素的方法及 其应用， 利用QuEChERS法构建粮油作物、 果品2 类 食品基质中真菌毒素的净化体系， 包括前处理、 净化剂的选择和用量优化、 及流动相的酸碱度对 净化剂的影响、 提取剂 的酸度优化， 以确保待测 真菌毒素的高加标回 收率； 结合UPLC ‑MS/MS确定 粮油作物和果品中的8种真菌毒素的定性和定量 分析方法。 本发明的方法操作简单、 快速、 毒素种 类多、 适用范围广， 方法学验证及实际样品检测 结果表明其灵敏度高、 精密度好、 实用性强， 满足 粮油作物和果品中痕量毒素定量 分析的要求， 对 监测、 评估食品中多组分真菌毒素的污染风险评 估和确证检测具有参考意义。 具有很强的实用性 和广泛的适用性。 权利要求书3页 说明书12页 附图3页 CN 115541751 A 2022.12.30 CN 115541751 A 1.同时测定多种真菌毒素的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1、 称取一定质量粉碎的空白样品于离心管中， 加入混合标准母液和提取液， 震荡后离 心取上清液； S2、 使用液相色谱串联质谱系统， 以GCB、 C18、 PSA为净化剂， 采用正负离子切换扫描模 式， 对上清液进行检测， 得到检测结果； 所述真菌毒素包括DON、 ZEN、 FB1、 OTA、 AFB1、 AFB2、 AFG1和AFG2； 所述混合标准母液采用84％的乙腈水溶液与标准真菌毒素配置， 所述标准真菌毒素包 括DON、 ZEN、 FB1、 OTA、 AFB1、 AFB2、 AFG1和AFG2， 其浓度分别为250、 250、 125、 50、 20、 20、 20和 20 μg/L； 所述提取液为含一定浓度甲酸的乙腈水 溶液； 所述检测的色谱条件为： 在正离子扫描模式下采用乙腈和0.1％甲酸+5mM 乙酸铵为酸 性流动相， 在负离 子扫描模式下采用乙腈和万分之一氨水+5mM乙酸铵为碱性 流动相。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述提取液为含质量浓度0.5％甲酸的 84％乙腈水 溶液； 空白样品为5 ‑20g。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 还 包括优化的净化剂： 碱性流动相条件下： GCB适合对DON的净化， C18和PSA适合对DON、 OTA、 ZEN、 FTB1、 FTB2、 AFG1和AFG2的净化； 酸性流动相条件下， GCB适合对FB1的净化， PSA适合对OTA、 ZEN、 FTB1、 FTB2、 AFG1和AFG2 的净化， C18适 合对OTA、 ZEN、 FTB1、 FTB2、 AFG1和AFG2的净化。 4.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 还 包括优化的质谱条件：权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 115541751 A 25.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 还包括对DON、 ZEN、 FB1、 OTA、 AFB1、 AFB2、 AFG1和AFG2的定量测定： 稀释混合标准母液作为混合标准工作液， 以待测物的质量浓度(X， μg/L)为横坐标， 定 量离子的峰面积(Y)为纵坐标， 绘制标准曲线， 得 出如下表的检出限和定量限： 碱性流动相条件 权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 115541751 A 3