(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211207889.1 (22)申请日 2022.09.30 (71)申请人 重庆市天友 乳业股份有限公司 地址 401120 重庆市渝北区金石大道 99号 (72)发明人 尹蔓妮　熊欣　陈伟　王玉英　 谷名育　江友娅　郭宇逍　薛艾莲　 张凤　袁峰　 (74)专利代理 机构 重庆西南 华渝专利代理有限 公司 50270 专利代理师 冯晓超 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) (54)发明名称 一种萃取牛乳中氯霉素残留的方法及其应 用 (57)摘要 本发明属于食品检测技术领域， 具体涉及一 种萃取牛乳中氯霉素残留的方法及其应用。 该萃 取牛乳中氯霉素残留的方法包括使用低共熔溶 剂与牛奶混合进行萃取， 低共 熔溶剂由四丁基溴 化铵和正辛 醇组成， 四丁基溴化铵与正辛醇的物 质量比例为1： (2 ‑3)。 该萃取牛乳中氯霉素残留 的方法操作简便； 而且基于该萃取牛乳中氯霉素 残留的方法的检测牛乳中氯霉素残留的检测回 收率可以达到60％以上， 回收率高， 检测限可以 达到1ug/L， 灵敏度高。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115372524 A 2022.11.22 CN 115372524 A 1.一种萃取牛乳中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 包括使用低共熔溶剂与牛奶混合 进行萃取， 低共熔溶剂由四丁基溴化铵和正辛醇组成， 四丁基溴化铵与正辛醇的物质量比 例为1： (2‑3)。 2.根据权利要求1所述的萃取牛乳 中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 牛奶与低共熔溶 剂的体积比为1： (0.1 ‑0.5)。 3.根据权利要求2所述的萃取牛乳 中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 牛奶与低共熔溶 剂的摩尔比为1： 0.25 。 4.根据权利要求1、 2或3所述的萃取牛乳中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 低共熔溶 剂、 牛奶和氯化钠混合后， 超声， 离心， 加乙腈取 上层， 震荡， 离心， 加入水后取 下层过滤。 5.根据权利要求4所述的萃取牛乳中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 震荡为使用 QuEChER进行震荡。 6.根据权利要求4所述的萃取牛乳 中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 氯化钠的浓度为 0.3g/ml‑0.6g/ml。 7.根据权利要求4或6所述的萃取牛乳中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 超声时间为 5min‑15min。 8.一种检测牛乳 中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 包括： 先使用权利要求1至7中任一 所述的萃 取牛乳中氯霉素残留的方法从牛乳中萃 取氯霉素， 然后使用液相色谱和质谱联用 的方法进行检测。 9.根据权利要求8所述的检测牛乳 中氯霉素残留的方法， 其特征在于， 液相色谱的洗脱 程序包括： 0≤t≤1min， 90％A， 10 ％B； 1＜t≤6min， 50％A， 50 ％B； 6＜t≤8min， 90％A， 10 ％ B； 其中A为水， B为乙腈。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115372524 A 2一种萃取牛乳中氯霉素 残留的方法及其应用 技术领域 [0001]本发明属于食品检测技术领域， 具体涉及 一种萃取牛乳中氯霉素残留的方法及其 应用。 背景技术 [0002]近年来， 牛乳食品安全备受关注。 氯霉素是一种广谱抗生素， 由于价格低廉被广泛 应用于预防和治疗细菌性疾病， 但其易在动物中残留。 比如在奶牛中的残留， 奶牛中残留的 氯霉素可以通过牛乳或牛乳食品进入人体， 残留的氯霉素能抑制人体骨髓造血功能， 减少 血细胞的数量， 引起再生障碍性贫血等， 对人体伤害较大。 而且我国规定了食品动物中禁止 使用氯霉素， 因此对牛乳中的氯霉素残留进行检测是有必要的。 [0003]目前牛乳中氯霉素残留的检测方法主要有微生物法、 免疫分析法和色谱分析法 等。 但是在氯霉素检测分析之前大多都需要从样品中进 行萃取， 再进行检测。 现有萃 取方法 通常是使用毒性强且挥发性大 的有机溶剂进行萃取， 易对人体和环境造成伤害。 比如公开 号为 CN112180015A的专利， 公开了一种检测牛奶中抗生素的方法， 该专利中的萃取方法包 括： 准确称取待测样品至聚丙烯离心管中， 加入表面活性剂的水溶液， 漩涡震 荡后超声再离 心， 取上清液； 所述表面活性剂为酯基季铵盐阳离子表面活性剂； 取上清液加入萃取溶剂 (四氯化碳和乙酸乙酯的混合溶剂)中， 漩涡振 荡离心， 取所得萃 取液层减压蒸馏去除溶剂， 再加超纯水稀释混匀， 经滤膜过滤， 得待测样品溶液。 该专利中使用了四氯化碳和乙酸乙酯 作为萃取溶剂， 四氯化碳具有很强的毒性且易挥发， 会对人体和环 境造成伤害； 而且该专利 中还使用了减压蒸馏， 操作复杂。 [0004]因此， 一种在保证萃取率的基础上， 并且低毒且操作比较简便 的萃取方便是有必 要的。 发明内容 [0005]针对以上问题， 本发明目的之一在于提供一种萃取牛乳中氯霉素残留的方法， 该 方法是通过由四丁基溴化铵和正辛醇组成的低共熔溶剂进行萃取， 萃取率高， 且低毒和操 作比较简便 。 [0006]为了达到上述目的， 本发明可以采用以下技 术方案： [0007]本发明一方面提供一种萃取牛乳中氯霉素残留的方法， 包括使用低共熔溶剂与牛 奶混合进行萃取， 低共熔溶剂由四丁基溴化铵和正辛醇组成， 四丁基溴化铵与正辛醇的物 质量比例为1： (2 ‑3)。 [0008]本发明另一方面提供一种检测牛乳中氯霉素残留 的方法， 其包括先使用上述的萃 取牛乳中氯霉素残留的方法从牛乳中萃取氯霉素， 然后使用液相色谱和质谱联用的方法进 行检测。 [0009]本发明有益效果包括： [0010](1)本发明提供的萃取牛乳中氯霉素残留的方法不需要减压蒸馏等操作步骤， 仅说　明　书 1/5 页 3 CN 115372524 A 3