(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211176267.7 (22)申请日 2022.09.26 (71)申请人 亿科检测认证有限公司 地址 215300 江苏省苏州市昆山市陆家镇 菉溪路23号 (72)发明人 胡爱生　阮大胜　陶小美　熊海瑶　 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 陈小龙 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/12(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/72(2006.01)G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种皮革制品中丙烯酰胺类化合物的检测 方法及其应用 (57)摘要 本发明提供一种皮革制品中丙烯酰胺类化 合物的检测方法及其应用， 所述检测方法包括以 下步骤： (1)将标准品与溶剂混合， 配制成标准工 作溶液； 提取皮革制品中的丙烯酰胺类化合物， 配制成试样溶液； (2)将步骤(1)得到的标准工作 溶液和试样溶液， 进行超高效液相色谱 ‑质谱检 测， 根据检测结果计算， 得到皮革制品中丙烯酰 胺类化合物的含量； 所述丙烯 酰胺类化合物包括 丙烯酰胺、 甲基丙烯酰胺或N ‑羟甲基丙烯 酰胺中 的任意一种或至少两种的组合。 本发 明提供的检 测方法能够有效检测皮革制 品中丙烯酰胺类化 合物的含量， 检测方法简单快捷、 检出限低、 抗基 质干扰强、 灵敏准确、 重复性及再现性优异。 权利要求书2页 说明书14页 附图2页 CN 115524421 A 2022.12.27 CN 115524421 A 1.一种皮革制品中丙烯酰胺类化合物的检测方法， 其特征在于， 所述检测方法包括以 下步骤： (1)将标准品与溶剂混合， 配制成标准工作溶液； 提取皮革制品中的丙烯酰胺类化合 物， 配制成试样溶 液； (2)将步骤(1)得到的标准工作溶液和试样溶液， 进行超高效液相色谱 ‑质谱检测， 根据 检测结果计算， 得到皮革制品中丙烯酰胺类化 合物的含量； 所述丙烯酰胺类化合物包括丙烯酰胺、 甲基丙烯酰胺或N ‑羟甲基丙烯酰胺中的任意一 种或至少两种的组合。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述标准品包括丙烯酰胺 标准品、 甲基丙烯酰胺标准品或N ‑羟甲基丙烯酰胺标准品中的任意一种或至少两种的组 合； 优选地， 步骤(1)中， 所述标准工作溶 液中标准品的浓度为0.0 01‑0.5mg/L； 优选地， 步骤(1)中， 所述标准工作溶液中的溶剂包括水、 甲醇或乙腈中的任意一种或 至少两种的组合； 优选地， 步骤(1)中， 所述试样溶 液中丙烯酰胺类化 合物的浓度为0.0 5‑0.2mg/L。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述试样溶液的配制 具体包括以下步骤： 将皮革制品剪碎， 采用萃取剂进行萃取； 然后将萃取液浓缩定容， 得到 待测液。 4.根据权利要求3所述的检测方法， 其特征在于， 所述剪碎为将皮革制品剪碎至任意维 度尺寸不大于5mm； 优选地， 所述萃取剂包括水、 正己烷、 异丙醇、 四氯化碳、 丙酮、 乙腈或甲醇中任意一种 或至少两种的组合， 优选为水和乙腈的组合； 优选地， 所述水和乙腈的体积比为1:(1 ‑2)； 优选地， 所述皮革制品与萃取剂的固液为1:(10 ‑50)g/mL； 优选地， 所述萃取在超声中进行， 所述超声的功率为75 ‑150W， 所述超声的时间为5 ‑ 60min。 5.根据权利 要求1‑4任一种所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述超高效液相 色谱‑质谱检测 中采用的色谱柱包括ACQUITY  UPLC BEH C18色谱柱、 ACQUITY  UPLC BEH  Shield RP8或ACQUITY  UPLC BEH Phenyl中的任意一种， 优选为ACQUITY  UPLC BEH C18色 谱柱； 优选地， 所述色谱柱的柱长为5 0‑150mm， 内径为1.8 ‑2.2mm， 填料粒径为1.5 ‑2.0 μm； 优选地， 所述色谱柱的柱温为 40‑60℃。 6.根据权利 要求1‑5任一项所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述超高效液相 色谱‑质谱检测中流动相包括甲醇、 乙酸铵 水溶液、 甲酸水溶液、 乙腈、 四氢呋喃或异丙醇中 任意一种或至少两种的组合； 优选地， 所述流动相包括流动相A和流动相B， 所述流动相A包括甲醇， 所述流动相B包括 乙酸铵水 溶液； 优选地， 所述乙酸铵水 溶液的摩尔浓度为5 ‑10mmol/L。 7.根据权利要求6所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115524421 A 2谱检测中的洗脱为等度洗脱， 在第0 ‑5min时， 所述流动相A的体积分数为8 ‑20％， 所述流动 相B的体积分数为9 2‑80％； 优选地， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中流动相的流速为0.2 ‑0.5mL/ min； 优选地， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中进样量 为5‑10 μL； 优选地， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中检测时间为1 ‑5min。 8.根据权利 要求1‑7任一项所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述超高效液相 色谱‑质谱检测中采用的电离源包括电喷雾离子源、 电子轰击源或大气压化学电离源中任 意一种， 优选为电喷雾 离子源； 优选地， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中采用负离 子扫描模式； 优选地， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中采用多反应 检测模式。 9.根据权利要求1 ‑8任一项所述的检测方法， 其特征在于， ， 步骤(2)中， 所述超高效液 相色谱‑质谱检测中离 子源的温度为140 ‑160℃； 优选地， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中脱溶剂 气温度为3 00‑400℃； 优选地， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱 ‑质谱检测中毛细管电压为2.0 ‑3.5kV。 10.一种根据权利要求1 ‑9中任一项所述的检测方法在皮革制品检测中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115524421 A 3