(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211137204.0 (22)申请日 2022.09.19 (71)申请人 杭州沐源生物医药 科技有限公司 地址 311121 浙江省杭州市余杭区舒心路 359号正元智慧B幢13 01-1310室 申请人 浙江和沐康医药 科技有限公司 (72)发明人 蒋晨　庹皓　陈蓓　黄燕斌　 陈伟娜　陈雪芳　韩上上　 (74)专利代理 机构 北京精金石知识产权代理有 限公司 1 1470 专利代理师 杨佩佩 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/34(2006.01)G01N 30/74(2006.01) B01J 20/288(2006.01) (54)发明名称 一种瑞巴派特片有关物质及异构体的分析 方法 (57)摘要 本申请公开了一种瑞巴派特片有关物质及 异构体的分析方法， 属于医药检测技术领域。 包 括如下步骤： 采用HPLC法， 以十六烷基键合硅胶 为填料， 采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱， 进入检测器进行检测， 所述的流动相A为磷酸盐 缓冲液， 所述的流动相B为三乙胺、 甲醇和异丙醇 混合液； 所述杂质为杂质A(间氯异构体)、 杂质B (邻氯异构体)、 杂质C(脱苯酰体)、 杂质D、 杂质E、 杂质F、 杂质H。 该检测方法能将 瑞巴派特及上述7 种杂质进行有效分离， 峰形良好， 检出能力强， 适 合有关物质及异构体的研究和控制。 权利要求书1页 说明书9页 附图7页 CN 115524417 A 2022.12.27 CN 115524417 A 1.一种瑞巴派特片有关物质及异构体的分析 方法， 其特 征在于： 包括如下步骤： 采用HPLC法， 以十六烷基键合硅胶为填料， 采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱， 进入 检测器进行检测； 所述的流动相A为磷酸盐缓冲液， 所述的流动相B为 三乙胺、 甲醇和异丙醇 混合液。 2.根据权利要求1所述的分析方法， 其特征在于： 所述的流动相A为含8 ‑12mmol/L乙酸 二己基铵的磷酸盐缓冲液， 所述的流动相B为体积比2 ‑4： 850:150的三乙胺、 甲醇和异丙醇 混合液。 3.根据权利要求2所述的分析方法， 其特征在于： 所述的流动相A为含10mmol/L乙酸二 己基铵的磷酸盐缓冲液； 所述的流动相B为体积比2:850:150的三乙胺、 甲醇和异丙醇混合 液。 4.根据权利要求1所述的分析 方法， 其特 征在于： 所述梯度洗脱过程 为： 0‑28分钟， 流动相A用量 为45％， 流动相B用量 为55％； 28‑40分钟， 流动相A用量 为45‑25％， 流动相B用量 为55‑75％； 40‑55分钟， 流动相A用量 为25％， 流动相B用量 为75％； 55‑56分钟， 流动相A用量 为25‑45％， 流动相B用量 为75‑55％； 56‑65分钟， 流动相A用量 为45％， 流动相B用量 为55％。 5.根据权利要求 4所述的分析 方法， 其特 征在于： 所述梯度洗脱过程 为： 0分钟， 流动相A用量 为45％， 流动相B用量 为55％； 28分钟， 流动相A用量 为45％， 流动相B用量 为55％； 40分钟， 流动相A用量 为25％， 流动相B用量 为75％； 55分钟， 流动相A用量 为25％， 流动相B用量 为75％； 56分钟， 流动相A用量 为45％， 流动相B用量 为55％； 65分钟， 流动相A用量 为45％， 流动相B用量 为55％。 6.根据权利 要求1所述的分析方法， 其特征在于： 所述色谱柱的温度为30 ‑40℃， 优选为 35℃。 7.根据权利要求1所述的分析 方法， 其特 征在于： 所述检测器的检测波长为23 5nm。 8.根据权利要求1所述的分析 方法， 其特 征在于： 所述的梯度洗脱的流速为0.5mL/mi n。 9.根据权利要求1所述的分析方法， 其特征在于： 检测过程中需要配制供试品， 所述的 供试品制备方法为： 取瑞巴派特片用玛瑙研钵研磨后， 称取粉末 置于量瓶中， 加入流动相B， 超声振摇后， 再加入流动相A， 继续超声， 用流动相A稀释至刻度， 摇匀， 过 滤， 即得； 所述的流动相B与粉末的体积质量比为9:17mg/mL。 10.根据权利要求1所述的分析方法， 其特征在于： 所述的有关物质及异构体为杂质A： 2‑(3‑氯苯甲酰氨 基)‑3‑(1,2‑二氢‑2‑氧代‑4‑喹啉基)丙酸； 杂质B： 2 ‑(2‑氯苯甲酰氨 基)‑ 3‑(1,2‑二氢‑2‑氧代‑4‑喹啉基)丙酸； 杂质C： 2 ‑氨基‑3‑(2‑氧代‑1,2‑二氢喹啉 ‑4‑基)丙 酸； 杂质D： 4 ‑氯‑N‑[2‑(1,2‑二氢‑2‑氧代‑4‑喹啉基)乙基]苯甲酰胺； 杂质E： 4 ‑氯‑N‑甲酰 基苯甲酰胺； 杂质F： 对氯苯甲酸； 杂质H： 2 ‑(3,4‑二氯苯甲酰胺基) ‑3‑(2‑氧代‑1,2‑二氢喹 啉‑4‑基)丙酸。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115524417 A 2一种瑞巴派特片有关物质及 异构体的分析方 法 技术领域 [0001]本发明属于医药检测技术领域， 具体涉及 一种瑞巴派特片有关物质及异构体的分 析方法。 背景技术 [0002]瑞巴派特是一种日本大冢制药公司开发的抗溃疡药物， 可用于改善糜烂、 出血、 红 肿、 水肿等胃粘膜的病变， 急性胃炎、 慢性胃炎的急性 发作。 该物质为胃粘膜保护剂 。 有预防 溃疡发生和促进溃疡愈合作用， 可增加胃粘膜血流量、 前列腺素E2的合 成和胃粘 液分泌。 可 清除氧自由基， 促进消化 性溃疡的愈合及炎症的改善 。 [0003]瑞巴派特， 化学名为： ( ±)2‑(4‑氯苯甲酰胺基) ‑3‑[2(1H)‑喹啉酮‑4]丙酸， 分子 式为： C19H15ClN2O4； 分子量为： 370.79； 结构式如下： [0004] [0005]经检索发现瑞巴派特片质量标准在JP17中有收载， 未控制有关物质， 安全风险较 高， 结合目前市面上已有原料药厂家的工艺路线， 瑞巴派特片中需研究的杂质有7个， 具体 如下： [0006]杂质A： 2‑(3‑氯苯甲酰氨基) ‑3‑(1,2‑二氢‑2‑氧代‑4‑喹啉基)丙酸(间氯异构体) [0007] [0008]杂质B： 2‑(2‑氯苯甲酰氨基) ‑3‑(1,2‑二氢‑2‑氧代‑4‑喹啉基)丙酸(邻氯异构体) [0009] [0010]杂质C： 2‑氨基‑3‑(2‑氧代‑1,2‑二氢喹啉 ‑4‑基)丙酸(脱苯酰体)说　明　书 1/9 页 3 CN 115524417 A 3