(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211148428.1 (22)申请日 2022.09.21 (71)申请人 江西济民可信药业有限公司 地址 336000 江西省宜 春市袁州区医药工 业园 申请人 江西金水宝制药有限公司 (72)发明人 易耀江　李义保　彭常春　易航　 马利雄　 (74)专利代理 机构 北京华科联合专利事务所 (普通合伙) 11130 专利代理师 王为 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/30(2006.01)G01N 30/32(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种小儿热咳口服液指纹图谱检测方法 (57)摘要 本发明提供了一种小儿热咳口服液指纹图 谱的检测方法。 在现有标准的基础上， 增加对药 品的相似度评价， 使药品的质量控制指标更加全 面； 本发明指纹图谱检测方法精密度、 稳定性、 重 现性良好。 本发明的检测方法， 包括参照物溶液 的制备； 供试品溶液的制备； 色谱条件： 以十八烷 基键合硅胶色谱柱流动相A为水， 流动相B为乙 腈， 进行梯度洗脱； 色谱峰测定： 精密吸取上述溶 液， 注入色谱仪， 采用中药色谱指纹图谱相似度 评价系统， 进行 数据分析。 权利要求书1页 说明书8页 附图2页 CN 115494173 A 2022.12.20 CN 115494173 A 1.一种小儿热咳口服液指纹图谱的检测方法， 其特征在于， 所述的检测方法包括如下 步骤： (a)参照物溶 液的制备： 取 连翘苷对照品适 量， 加甲醇制成溶 液， 过滤， 即得； (b)供试品溶液的制备： 精密吸取样品至容量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 过滤， 即 得； (c)色谱条件： 以十八烷基键合硅胶色谱柱流动相A为水， 流动相B为乙腈， 进行梯度洗 脱， 流速0.8～1.2ml/min； 柱温15～35℃； 检测波长197nm； 塔板数以连翘苷计不得低于 5000； (d)色谱峰测定： 精密吸取上述溶液各10μl， 注入色谱仪， 采用中药色谱指纹图谱相似 度评价系统(2012年版)， 进行 数据分析， 相似度不应低于 0.90。 2.如权利要求1所述指纹图谱检测方法， 其特征在于， 所述步骤(a)参照物溶液的制备， 所述连翘苷的浓度为0.04～1mg/mL。 3.如权利要求1所述指纹图谱检测方法， 其特征在于， 所述步骤(b)供试品溶液的制备： 取装量差异项下的供试品溶液， 精密吸取1ml至10ml容量瓶中， 加 50％甲醇稀释至刻度， 摇 匀， 过滤， 即得。 4.如权利要求1所述指纹图谱检测方法， 其特征在于， 所述步骤(c)色谱条件为： 以十八 烷基键合硅胶色谱柱 流动相A为水， 流动相B为乙腈， 进行线性梯度洗脱， 流速1.0ml/min； 柱 温30℃； 检测波长197nm； 塔板数以连翘苷计不得低于 5000。 5.如权利要求1所述指纹图谱检测方法， 其特 征在于， 梯度洗脱方式为： 0‑5min， 流动相A所占的体积比为： 10 0％， 流动相B所占体积比0％； 5‑10min， 流动相A所占的体积比为： 10 0％→95％， 流动相B所占体积比0％ →5％； 10‑30min， 流动相A所占的体积比为： 95％ →90％， 流动相B所占体积比5％ →10％； 30‑32min， 流动相A所占的体积比为： 90％ →85％， 流动相B所占体积比10％ →15％； 32‑75min， 流动相A所占的体积比为： 85％， 流动相B所占体积比15％； 75‑80min， 流动相A所占的体积比为： 85％ →70％， 流动相B所占体积比15％ →30％； 80‑85min， 流动相A所占的体积比为： 70％ →60％， 流动相B所占体积比3 0％→40％； 85‑90min， 流动相A所占的体积比为： 6 0％→40％， 流动相B所占体积比40％ →60％； 90‑95min， 流动相A所占的体积比为： 40％ →100％， 流动相B所占体积比6 0％→0％； 95‑100min， 流动相A所占的体积比为： 10 0％， 流动相B所占体积比0％。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115494173 A 2一种小儿热咳口服液指纹图谱检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及一种小儿热咳口服液指纹图谱检测方法， 属于中成药检验分析 领域。 背景技术 [0002]小儿热咳口服液是由蜜麻黄、 生石膏、 苦杏仁、 连翘、 大黄、 瓜蒌、 桑白皮、 败酱草、 红花、 炙甘 草十味药提取制成， 具有清热宣肺， 化痰止咳。 用于痰热壅肺证所致的咳嗽， 痰黄 或候中痰鸣， 发热， 咽痛， 口渴， 大便 干， 小儿急性支气管 上述证候 者。 [0003]现行法定标准YBZ00452012只有 常用的鉴别、 含量， 为了进一步探索小儿热咳口服 液的指标性成分的情况， 现采用指纹图谱方法对其相似度进行控制， 使药品的质量控制更 加全面。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种小儿热咳口服液指纹图谱检测方法， 该方法采用高效 液相法对样品进行有效分离， 10批以上样品拟合对照指纹图谱， 采用中药评价系统(2012 版)进行评价， 相似度要求大于0.90,； 进一步提高小儿热 咳口服液的控制标准， 以保证小儿 热咳口服液的质量稳定、 均一 性。 [0005]本发明所述的检测方法， 包括以下步骤： [0006](a)参照物溶 液的制备： 取 连翘苷对照品适 量， 加甲醇制成溶 液， 过滤， 即得。 [0007](b)供试品溶液的制备： 精密吸取样品至容量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 过 滤， 即得。 [0008](c)色谱条件： 以十八烷基键合硅胶色谱柱流动相A为水， 流动相B为乙腈， 进行梯 度洗脱， 流速0.8～1.2ml/min； 柱温15～35℃； 检测波长197nm； 塔板数以连翘苷计不得低于 5000。 [0009](d)色谱峰测定： 精密吸取上述溶液各10μl， 注入色谱仪， 采用中药色谱指纹图谱 相似度评价系统(2012年版)， 进行 数据分析， 相似度不应低于 0.90。 [0010]作为本发明的优选， 所述步骤(a)对照品溶液的制备中， 所述连翘苷的浓度为0.04 ～1mg/mL。 [0011]作为本发明的优选， 所述步骤(b)供试品溶液的制备中， 取装量差异项下的供试 品 溶液， 精密吸取1ml至10ml 容量瓶中， 加5 0％甲醇稀释至刻度， 摇匀， 过 滤， 即得。 [0012]作为本发明的优选， 所述步骤(c)色谱条件中， 以十八烷基键合硅胶色谱柱流动相 A为水， 流动相B为乙腈， 进行线性梯度洗脱， 流速1.0ml/min； 柱温30℃； 检测波长197nm； 塔 板数以连翘苷计不得低于 5000， 其流动相所采用的线性梯度洗脱条件为： [0013]0‑5min， 流动相A所占的体积比为： 10 0％， 流动相B所占体积比0％； [0014]5‑10min， 流动相A所占的体积比为： 10 0％→95％， 流动相B所占体积比0％ →5％； [0015]10‑30min， 流动相A所占的体积比为： 95％ →90％， 流动相B所占体积比5％ →10％； [0016]30‑32min， 流动相A所占的体积比为： 90％ →85％， 流动相B所占体积比10％ →说　明　书 1/8 页 3 CN 115494173 A 3