(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211116185.3 (22)申请日 2022.09.14 (71)申请人 山东宏济堂制药集团股份有限公司 地址 250103 山东省济南市历城区经十东 路30766号宏济堂中药研究院 (72)发明人 张爱均　孟兆青　胥清翠　张良棕　 姜娟娟　陶凯　李泓霖　李樱　 李彤　高春雨　 (74)专利代理 机构 济南千慧专利事务所(普通 合伙企业) 37232 专利代理师 王敏 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种定量检测金贝口服液挥发性 成分的GC- MS方法 (57)摘要 本申请公开了一种定量检测金贝口服液挥 发性成分的GC ‑MS方法， 属于药品检测技术领域。 包括下述步骤： 配制金贝口服液挥发性成分的供 试品溶液； 配制混合对照品溶液； 将混合对照品 溶液注入GC ‑MS联用仪， 确定对照品溶液中10种 化合物的出峰位置、 峰面积及其定性定量离子 对， 以峰面积为纵坐标， 质量浓度为横坐标， 绘制 标准曲线， 得到各组分的线性方程和相关系数； 将供试品溶液注入GC ‑MS联用仪， 按照各出峰面 积以及定性定量离子对丰度比进行定量分析， 按 照线性方程计算供试品溶液中10种化合物的含 量。 该方法具有良好的线性、 灵敏度、 准确度和重 复性， 能够对金贝口服液挥发性成分中10种重要 化合物进行定量分析。 权利要求书2页 说明书10页 附图2页 CN 115420830 A 2022.12.02 CN 115420830 A 1.一种定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特 征在于， 包括下述 步骤： (1)配制金贝口服液挥发性成分的供 试品溶液； (2)配制混合对照品溶液， 所述混合对照品溶液为4 ‑乙基愈创木酚、 丁烯基苯酞、 新蛇 床内酯、 藁本内酯、 补骨脂素、 东莨菪内酯、 洋川芎内酯H、 洋川芎内酯I、 蛇床子素和汉黄芩 素的混合溶 液； (3)将步骤(2)制 备的混合对照 品溶液注入GC ‑MS联用仪， 确定对照品溶液中10种化合 物的出峰位置、 峰面积及其定性定量离子对， 以峰面积为纵坐标， 质量浓度为横坐标， 绘制 标准曲线， 得到各组分的线性方程和相关系数； (4)将步骤(1)制备的供试品溶液注入GC ‑MS联用仪， 按照各出峰面积以及定性定量离 子对丰度比进行定量分析， 按照步骤(3)所得的线性方程计算供试品溶液中10种化合物的 含量。 2.根据权利要求1所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 步骤(3)和步骤(4)中， 供 试品溶液和混合对照品溶 液注入GC ‑MS联用仪的测试 条件为： GC采用HP ‑5MS型毛细管色谱柱(0.250mm ×30m， 0.25 μm)， 前进样口温度： 270℃； 传输线 温度： 300℃； 柱流 量： 0.72ml/mi n， 恒流； 进样量0.2 μl， 不分流进样； MS数据采集采用多反应监测模式。 3.根据权利要求2所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 步骤(3)和步骤(4)中色谱柱程序升温条件具体为： 初温60℃， 以30℃/min升温至15 0℃； 再以10℃/mi n升温至170℃； 再以20℃/mi n升温至190℃； 再以15℃/mi n升温至23 5℃， 保持2mi n； 再以10℃/mi n升温至25 0℃； 再以15℃/mi n升温至26 5℃； 最后以35℃/min升温至300℃， 保持3mi n。 4.根据权利要求1所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述供试品溶液的制备步骤为： 取脱 水后的金贝口服液， 加入等量乙酸乙酯溶剂提取三次， 合并提取后的乙酸乙酯溶液后蒸干得到残渣， 所述残渣加乙酸乙酯溶液溶解， 过滤并取滤 液， 即得； 优选的， 所述供试品溶液的制备步骤为： 取20ml脱水后的金贝口服液， 加入等量乙酸乙 酯提取三次， 合并乙酸乙酯液后蒸干得到残渣， 所述残渣加5ml乙酸乙酯溶剂溶解， 使用 0.22 μm滤膜进行 过滤并取滤液， 即得。 5.根据权利要求1所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述混合对照品溶液的制备步骤为： 分别称量4 ‑乙基愈创木酚、 丁烯基苯酞、 新蛇床内酯、 藁本内酯、 补骨脂素、 东莨菪内酯、 洋川芎内酯H、 洋川芎内酯I、 蛇床子素和汉黄芩素， 采用 甲醇溶剂分别配制浓度为 1000ppm对照品储 备液， 各取上述10种对照品储 备液， 加甲醇稀释 并摇匀， 即得混合对照品溶 液。 6.根据权利要求5所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述混合对照品溶 液中， 10种化 合物的浓度为0.0 5mg/L‑10mg/L；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115420830 A 2优选的， 所述混合对照品溶 液中， 10种化 合物的浓度相等。 7.根据权利要求1所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述步骤(2)之前， 还包括采用GC ‑MS联用仪对供试品溶液进行定性测试的步骤， 将所述供 试品溶液注入GC ‑MS联用仪， 得到总离子流色谱图， 并通过二级质谱对所述供试品溶液中的 组分鉴定 。 8.根据权利要求7所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述定性测试步骤的测试 条件为： GC采用HP ‑5MS型毛细管色谱柱(0.250mm ×30m， 0.25 μm)， 前进样口温度： 270℃； 传输线 温度： 300℃； 柱流 量： 0.72ml/mi n， 恒流； 进样量0.2 μl， 不分流进样； MS采用MS1扫描， 扫描范围： m/ z 50～500， 扫描时间3 00ms。 9.根据权利要求8所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述定性测试中色谱柱程序升温条件具体为： 初温55℃， 以20℃/mi n升温至13 5℃； 再以5℃/mi n升温至15 0℃； 再以6℃/mi n升温至2 25℃； 再以20℃/mi n升温至270℃， 保持10mi n； 再以25℃/mi n升温至300℃， 保持10mi n。 10.根据权利要求7所述的定量检测金贝口服液挥发性成分的GC ‑MS方法， 其特征在于， 所述定性测试中， 在供试品溶液中鉴定出48种化合物， 具体为： 2 ‑羟基‑5‑甲基苯乙酮、 间羟 基苯甲醛、 苯戊酮、 L ‑酪氨酸、 小星蒜碱、 二氢茉莉酮、 香兰素、 乳糖、 对羟基苯甲酸乙酯、 抗 氧化剂BHT、 4 ‑乙基愈创木酚、 原儿茶醛、 对羟基苯丙酸、 二氢松柏醇、 ɑ‑紫罗酮、 丁烯基苯 酞、 β‑大马酮、 洋川芎内酯H、 洋川芎内酯I、 新蛇床内酯、 E ‑藁本内酯、 4 ‑叔丁基茴香醚、 丁香 醛、 补骨脂素、 反式阿魏酸、 2,8 ‑二氮杂螺[5,5]十一烷 ‑1,3,7,9‑四酮、 环(脯氨 酸‑亮氨酸) 二肽、 棕榈酸、 东莨菪内酯、 乙羟茶碱、 佛手柑内酯、 正二十一烷、 蛇床子素、 硬脂酸、 正二十 二烷、 2,6,10,14 ‑四甲基十九烷、 正二十四烷、 正二十五烷、 正三十烷、 汉黄芩素、 芥酸、 正三 十一烷、 正三十二烷、 正三十四烷、 去氢双松柏醇、 连翘 脂素、 正三十六烷和正四十烷。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115420830 A 3