(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211126985.3 (22)申请日 2022.09.16 (71)申请人 中国人民解 放军军事科学院军事医 学研究院 地址 100850 北京市海淀区太平路27号 (72)发明人 高月　汤响林　王宇光　马增春　 周维　肖成荣　郝斐然　 (74)专利代理 机构 重庆市信立达专利代理事务 所(普通合伙) 50230 专利代理师 朱月明 (51)Int.Cl. A61K 36/482(2006.01) A61P 19/06(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 13/12(2006.01)G01N 30/06(2006.01) G01N 30/02(2006.01) A61K 131/00(2006.01) (54)发明名称 一种决明子水提物在制备降尿酸药物中的 应用 (57)摘要 本发明公开了一种决明子水提物在制备降 尿酸药物中的应用， 涉及生物技术领域， 其技术 方案要点是： 取决明子500g， 加入8倍量水浸没药 材， 浸泡30min后， 加热至煮沸， 保持微沸60min， 分离煎出液， 药渣加入4倍量水依法再次煎煮 30min， 合并2次煎出液， 放置于50℃水浴锅中缓 慢蒸发， 浓缩至500mL。 最后一次给药后的24小时 内对动物产生的尿液进行收集； 将收集的尿液放 入离心机中以转速3000rpm离心10min， 用移液器 将1mL上清液转移 至1.5mLEP管中， 离心后的样本 于‑80℃冰箱中保存待测； 混合所有的尿液样本 即得质控样本； 进行物质定性和半定量分析。 决 明子水提物给药后， 尿酸水平下调， 决明子水提 物可减少高尿酸水平对肾脏的损伤， 从而发挥治 疗糖尿病肾病的作用。 权利要求书1页 说明书3页 附图4页 CN 115487222 A 2022.12.20 CN 115487222 A 1.一种决明子水提物在制备降尿酸药物中的应用， 其特 征是， 包括如下步骤： S1： 取决明子500g， 加入8倍量水浸没药材， 浸泡30min后， 加热至煮沸， 保持微沸60min， 分离煎出液， 药渣加入4倍量水依法再次煎煮30min， 合并2次煎出液， 放置于50℃水浴锅中 缓慢蒸发， 浓 缩至500mL(按生药算， 浓度相当于1g ·mL‑1)； S2： 样本的收集与制备； 连续给药14天后， 在最后一次给药后的24小时内对动物产生的 尿液进行收集； 将收集的尿液放入离心机中以转速3000rpm离心10min， 用移液器将1mL上清 液转移至1.5mL  EP管中， 离心后的样本 于‑80℃冰箱中保存待测； S3： 样品制备； 取步骤S1中的样本600μL， 常温解冻； 加入600μL乙腈， 涡旋混匀， 静置 2min， 在4℃下离心 20min， 取上清液， 经0.2 2 μm微孔滤膜滤 过后进样； S4： 质控样本(QC)制备； 混合所有的尿液样本即得； S5： 色谱检测； 用高分辨 率的UPLC ‑Q‑TOF/MS进行物质定性和半定量分析。 2.根据权利要求1所述的一种决明子水提物在制备降尿酸药物中的应用， 其特征是： 所 述步骤S3中质控样本(QC)通过 连续5针进样平衡系统， 插 入检测序列中。 3.根据权利要求1所述的一种决明子水提物在制备降尿酸药物中的应用， 其特征是： 所 述步骤S4中进行色谱检测， 色谱柱柱温30℃， 流速0.5mL ·min‑1； 进样量:5 μL， 质谱条件如 下： 溶剂系统及洗脱程序如下： 权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115487222 A 2一种决明子水提物在制备降尿酸药物中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 更具体地说， 它涉及一种决明子水提物在制 备降尿酸 药物中的应用。 背景技术 [0002]决明子是豆科植物决明以及小决明的成熟干燥种子， 始载于 《神农本草经》 列为上 品药， 为我国药典收载的常用中药。 其性 味甘、 苦、 咸， 微寒。 归肝、 大肠经。 其主要成分为蒽 醌类和萘并吡喃酮类化合物。 对羞明多泪、 目赤涩痛、 眩晕、 头痛、 习惯性便秘、 小便不利等 病症均具有作用。 现代药理研究证明决明子具有抗菌、 保肝、 降血压、 降血脂等活性， 同时又 可作为保健饮品的原料。 [0003]代谢组学是系统生物学的一个小分支， 其组学的理念与中医药的整体观不谋而 合。 因此， 引入代谢组学技 术对中药进行研究， 有助于从整体上阐释中 医药的作用机制。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供一种决明子水提物在制备降尿酸药物中的应用， 该药常见药 理活性表现为降脂、 降压、 保肝等。 采用高分辨率的UPLC ‑Q‑TOF/MS进行物质定性和半定量 分析， 正常大鼠、 决明子水提物给药后大鼠的尿液成分谱变化， 首次发现降尿酸作用， 为决 明子的新临床应用提供参 考。 [0005]本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的： 一种决明子水提物在制 备降尿酸药物中的应用， 包括如下步骤， S1： 取决明子500g， 加入8倍量水浸没药材， 浸泡 30min后， 加热至煮沸， 保持微沸60min， 分离煎出液， 药渣加入4倍量水依法再次煎煮30min， 合并2次煎出液， 放置于50℃水浴锅中缓慢蒸发， 浓缩至500mL(按生药算， 浓度相当于1g · mL‑1)； [0006]S2： 样本的收集与制备； 连续给药14天后， 在最后一次给药后的24小时内对动物产 生的尿液进行收集； 将收集的尿液放入离心机中以转速3000rpm离心10min， 用移液器将1mL 上清液转移至1.5mL  EP管中， 离心后的样本 于‑80℃冰箱中保存待测； [0007]S3： 样品制备； 取步骤S1中的样本600μL， 常温解冻； 加入600μL乙腈， 涡旋混匀， 静 置2min， 在4℃下离心 20min， 取上清液， 经0.2 2 μm微孔滤膜滤 过后进样； [0008]S4： 质控样本(QC)制备； 混合所有的尿液样本即得； [0009]S5： 色谱检测； 用高分辨 率的UPLC ‑Q‑TOF/MS进行物质定性和半定量分析。 [0010] [0011]本发明进一步设置为： 所述步骤S3中质控样本(QC)通过连续5针进样平衡系统， 插 入检测序列中。 [0012]本发明进一步设置为： 所述步骤S4中进行色谱检测， 色谱柱柱温30℃， 流速 0.5mL·min‑1； 进样量:5 μL， 质谱条件如下：说　明　书 1/3 页 3 CN 115487222 A 3