(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211108737.6 (22)申请日 2022.09.13 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 顾芹英　张云天　翟燕娟　周敏　 周海琴　胡建虹　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 柏尚春 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/14(2006.01) G01N 30/34(2006.01)G01N 30/36(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种丝瓜络UPLC特征图谱的构建和检测方 法 (57)摘要 本发明公开了一种丝瓜络UPLC特征图谱的 构建和检测方法， 包括以下步骤： （1） 供试品溶液 的制备： 取丝瓜络， 加入提取溶剂 进行提取， 得到 供试品溶液； （2） 特征图谱的建立： 吸取上述的供 试品溶液， 注入超高效液相色谱仪， 测定， 得到 UPLC特征图谱； （3） 色谱峰的归属： 与对照品比 对， 对其共有峰进行归属。 本发明通过采用超高 效液相色谱法， 并对色谱条件进行合理控制， 共 确定了7个特征峰， 其中4个峰经指认为有机酸类 成分， 专属性较好， 能够比较全面地反应丝瓜络 的特征， 可以为丝瓜络的内在质量控制提供新的 分析手段， 检测全面、 快速、 简便， 分析效率高， 溶 剂消耗量少， 对环境污染小。 权利要求书1页 说明书10页 附图7页 CN 115436520 A 2022.12.06 CN 115436520 A 1.一种丝瓜络UPLC特 征图谱的构建方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： （1） 供试品溶液的制备： 取丝瓜络， 加入提取 溶剂进行提取， 得到供 试品溶液； （2） 特征图谱的建立： 吸取上述的供试品溶液， 注入超高效液相色谱仪， 测定， 得到UPLC 特征图谱； （3） 色谱峰的归属： 与对照品比对， 对其共有峰进行归属， 其中4个峰经指认为有机酸类 成分， 分别为原儿茶酸、 对羟基苯甲酸、 香 草酸和咖啡酸。 2.根据权利要求1所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中 所述提取溶剂为甲醇， 水， 体积浓度为30 ‑70%甲醇水溶液或30 ‑70%乙醇水溶液中的任意一 种。 3.根据权利要求1所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中 所述提取方式为超声处 理、 振摇提取或加热回流， 提取时间为15 ‑60min。 4.根据权利要求1所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 （2） 中 所述超高效液相相色谱的条件为： 色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂； 以乙腈为流动相 A， 以0.1%磷酸溶液或水为流动相B， 按以下梯度进行洗脱： 0min ‑3min‑9min‑15min‑21min‑ 28min‑30min， 流动相A： 2 %‑3%‑6%‑8%‑9%‑10%‑10%。 5.根据权利要求4所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 所述色谱柱 柱温为30‑40℃； 检测波长为23 5nm~260nm。 6.根据权利要求4所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 所述流动相 流速为0.25 ‑0.35ml/min。 7.根据权利 要求1所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构 建方法， 其特征在于， 所述UPLC特 征图谱包括7个特征峰， 以峰4为参比峰， 峰1~7的相对保留时间分别为0.43 ±10%， 0.69 ± 10%， 0.90 ±10%， 1.00±10%， 1.08 ±10%， 1.58 ±10%， 1.82 ±10%。 8.根据权利要求7所述的丝瓜络的UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 （3） 中 所述4个峰分别对应于7个特 征峰中的峰1， 峰2， 峰4和峰5 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115436520 A 2一种丝瓜 络UPLC特征图谱的构建和检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及一种特征图谱的构建和检测方法， 尤其涉及一种丝瓜络UPLC特征图谱 的构建和检测方法。 背景技术 [0002]目前研究发现丝瓜络中主要含有木聚糖及纤维素， 还含有甘露聚糖、 半乳聚糖及 木质素等。 不同品种和产地的丝瓜络均有较高含量的多糖。 丝瓜络中含有多种丝瓜皂苷、 黄 酮和酚类、 蛋白质和氨基酸类、 油脂和无机元 素及有机酸类等。 [0003]丝瓜络为较常用中药， 但关于丝瓜络的研究资料较少， 缺乏整体质量控制手段。 中 药指纹图谱或特征图谱是一种综合的， 可量化的鉴定手段， 可用于评价中药材、 中药制剂以 及半成品质量， 是对中药整体质量控制的手段， 能够系统、 整体、 专属地来表征中药的内在 特征。 [0004]在现有技术中关于丝瓜络 的特征图谱或指纹图谱的研究较少， 仅有的1篇关于药 材方面的专利 为刘丽娟等(CN201510732396.3)的一种关于丝瓜络的高效液相色谱指纹图 谱建立及其标准指纹图谱和用途， 该方法色谱分析时间长达8 0分钟， 基线波动较大， 色谱峰 的分离度不佳， 且峰对应的化学成分不明确。 在供试品制备过程中， 采用聚酰胺色谱柱， 经 过水洗、 30％乙醇洗脱， 制备 过程较为复杂， 不利于快速、 大量的检测。 发明内容 [0005]发明目的： 本 发明旨在提供一种检测全面、 快速、 简便的丝瓜络UPLC特征图谱的构 建和检测方法。 [0006]技术方案： 本发明所述的丝瓜络UPLC特 征图谱的构建方法， 包括以下步骤： [0007](1)供试品溶液的制备： 取丝瓜络， 加入提取 溶剂进行提取， 得到供 试品溶液； [0008](2)特征图谱的建立： 吸取上述的供试 品溶液， 注入超高效液相色谱仪， 测定， 得到 UPLC特征图谱； [0009](3)色谱峰的归属： 与对照品比对， 对其共有峰进行归属， 其中4个峰经指认为有机 酸类成分， 分别为原儿茶酸、 对羟基苯甲酸、 香 草酸和咖啡酸。 [0010]进一步地， 步骤(1)中所述提取溶剂 为甲醇， 水， 体积浓度为30 ‑70％甲醇水溶液或 30‑70％乙醇水 溶液中的任意 一种。 [0011]进一步地， 步骤(1)中所述提取方式为超声处理、 振摇提取或加热回流， 提取时间 为15‑60min。 [0012]进一步地， 步骤(2)中所述超高效液相相色谱的条件为： 色谱柱以十八烷基键合硅 胶为填充剂； 以乙腈为流动相A， 以0.1％磷酸溶液或水为流动相B， 按以下梯度进行洗脱： 0min‑3min‑9min‑15min‑21min‑28min‑30min， 流动相A： 2％ ‑3％‑6％‑8％‑9％‑10％‑10％。 [0013]进一步地， 所述色谱柱柱温为30 ‑40℃； 检测波长为235nm～260nm； 流动相流速为 0.25‑0.35ml/min。说　明　书 1/10 页 3 CN 115436520 A 3