(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211432735.2 (22)申请日 2022.11.16 (71)申请人 深圳市海 滨制药有限公司 地址 518000 广东省深圳市 盐田区沙 头角 深盐路2003号 (72)发明人 梁立睿　叶飞　王涛　颜晓丽　 欧军　林楠棋　孙万鹏　 (74)专利代理 机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 专利代理师 任文生 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/36(2006.01) (54)发明名称 一种三氮唑类药物中1,2,4-三氮唑的检测 方法 (57)摘要 本申请属于色谱分析技术领域， 尤其涉及一 种三氮唑类药物中1,2,4 ‑三氮唑的检测方法。 本 申请的方法， 包括： 在缓冲溶液条件下， 将三氮唑 类药物样品与芴甲氧羰酰氯乙腈溶液发生衍生 化反应， 然后加入稀释剂， 得到衍生化产物溶液； 将衍生化产物溶液采用高效液相色谱进行检测， 得到三氮唑类药物中1,2,4 ‑三氮唑的定性定量 检测结果； 条件为： 十八烷基为填充剂的色谱柱； 以甲酸水溶液为流动相A， 以乙腈为流动相B； 本 申请的方法专属性良好、 灵敏度高， 结果准确可 靠， 可用于 艾氟康唑工艺中任何一步中间体的1, 2,4‑三氮唑杂质的质量控制， 同时也支持任何三 氮唑类药物中1,2,4 ‑三氮唑杂质的质量控制。 权利要求书2页 说明书7页 附图2页 CN 115494183 A 2022.12.20 CN 115494183 A 1.一种三氮唑类药物中1,2,4 ‑三氮唑的检测方法， 其特 征在于， 包括： 在缓冲溶液条件下， 将三氮唑类药物样品与芴甲氧羰酰氯乙腈溶液发生衍生化反应， 然后加入 稀释剂， 得到衍 生化产物溶 液； 将所述衍生化产物溶液采用高效液相色谱进行检测， 得到三氮唑类药物中1,2,4 ‑三氮 唑的定性定量检测结果； 所述高效液相色谱的条件为： 十八烷基为填充剂的色谱柱； 以甲酸水溶液为流动相A， 以乙腈为流动相B； 洗脱的方法为： 采用梯度洗脱的方式使流动相通过色谱柱， 然后进行紫 外检测； 在0~15min， 所述流动相A在流动相中的质量含量从70% ‑80%下降到50%~60%， 所述流动 相B在流动相中的质量含量从20%~30%增加到40%~50%； 在15~20min， 所述流动相A在流动相中 的质量含量从50%~60%下降到45%~55%， 所述流动 相B在流动相中的质量含量从40% ‑50%增加到45%~55%； 在20~21min， 所述流动相A在流动相中 的质量含量从45%~55%下降到20%~30%， 所述流动 相B在流动相中的质量含量从45%~55%增加到70%~80%； 在21~26min， 所述流动相A和所述流动相 B进行等度洗脱， 所述流动相A在流动相中的质 量含量为20%~30%， 所述流动相B在流动相中的质量含量 为70%~80%。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述缓冲溶液选自磷酸缓冲盐或/和 吡啶。 3.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述缓冲溶液为硼砂缓冲盐或磷酸缓 冲盐， 采用调节溶 液调节所述缓冲溶 液的pH至8~12。 4.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的芴甲氧 羰酰氯浓度为2~8 mg/mL。 5.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的芴甲氧 羰酰氯浓度为5  mg/mL。 6.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述流动相A为体积分数为0.05%~ 0.15%的甲酸水溶液。 7.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述稀释剂为乙腈 ‑水溶液， 所述乙腈 与所述水的体积比为10 0： 0~50： 50。 8.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 在0~15min， 所述流动相A在流动相中 的质量含量从76%下降到 55%， 所述流动相B在流动相中的质量含量从24%增 加到45%； 在15~20min， 所述流动相A在流动相中的质量含量从55%下降到50%， 所述流动相B在流 动相中的质量含量从45%增 加到50%； 在20~21min， 所述流动相A在流动相中的质量含量从50%下降到25%， 所述流动相B在流 动相中的质量含量从5 0%增加到75%； 在21~26min， 所述流动相A和所述流动相 B进行等度洗脱， 所述流动相A在流动相中的质 量含量为25%， 所述 流动相B在流动相中的质量含量 为75%。 9.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱检测过程中的流动 相流速为1.1 ‑1.3mL/mi n； 所述色谱柱的柱温为25 ‑35℃； 所述色谱柱的粒径为3.0 ‑5.0 μm。 10.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱检测过程中的检权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115494183 A 2测波长为20 5nm‑215nm。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115494183 A 3