(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211332102.4 (22)申请日 2022.10.28 (71)申请人 成都施贝康生物医药 科技有限公司 地址 611730 四川省成 都市高新区天宇路2 号26栋1单元1号 (72)发明人 徐霞　彭桢利　李连明　文涛　 张海　 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/04(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种丁苯酞及其有关物质检测方法 (57)摘要 本发明涉及药物检测分析领域， 具体涉及一 种丁苯酞及其有关物质的检测方法。 本发明的检 测方法采用高效液相色谱法， 采用5 ‑氟苯基丙基 键合硅胶为填充剂， 采用紫外检测器， 检测波长 210～280n m， 以酸性盐溶液为流动相A， 甲醇和乙 腈的混合溶液为流动相B， 按梯度洗脱。 本发明提 供的检测方法稳定、 专属性好、 灵敏度和准确度 高， 适合用于丁苯酞及其有关物质的药品注册质 量研究。 权利要求书1页 说明书12页 附图3页 CN 115469039 A 2022.12.13 CN 115469039 A 1.一种丁苯酞及其有关物质的检测方法， 采用高效液相色谱法， 其特征在于， 所述方法 采用5‑氟苯基丙基键合硅胶为填充剂， 采用紫外检测器， 检测波长210nm～280nm， 以酸性pH 值的盐溶 液为流动相A， 甲醇和乙腈的混合溶 液为流动相B， 按梯度洗脱。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述有关物质包含但不 限于羟基丁苯酞、 丁烯苯酞、 邻戊烯苯甲酸、 丙苯酞、 邻苯二甲酸、 邻苯二甲酸单丁酯、 邻戊酰基苯甲酸、 邻苯 二甲酸二丁酯、 1,2 ‑二戊酰基苯中的一种或多种。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述盐溶液的盐包含磷酸二氢钾、 磷酸二 氢钠、 磷酸 二氢铵、 醋酸铵、 醋酸钠或醋酸钾。 4.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 所述盐溶 液的浓度为1～5 0mmol/L。 5.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述盐溶液的pH值为1.0～5.0； 所述盐溶 液的pH调节剂包 含磷酸、 盐酸或乙酸。 6.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述检测波长为230 ±10nm， 优选为230 ± 3nm。 7.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述流动相B中甲醇和乙腈的体积比为1： （0.8～4） 。 8.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 所述梯度洗脱包 含如下程序： 。 9.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 所述方法包括如下步骤： （1） 精密称取丁苯酞或任选地丁苯酞有关物质适量， 用溶剂稀释制 成供试品溶液或混 合溶液； （2） 将供 试品溶液或混合溶 液注入液相色谱仪中， 按照色谱条件检测。 10.根据权利 要求9所述的方法， 其特征在于， 所述溶剂包含甲醇、 乙醇、 30～60%乙腈水 溶液或流动相A与乙腈的体积比为70～40： 30～60混合溶液； 优选30～60%乙腈水溶液或流 动相A与乙腈的体积比为70～40： 3 0～60混合溶液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115469039 A 2一种丁苯酞及其有关物质检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及药物检测分析 领域， 具体涉及一种丁苯酞及其有关物质的检测方法。 背景技术 [0002]丁苯酞化学名为3 ‑丁基‑l(H)‑异苯并呋喃酮， 为消旋 ‑3‑正丁基苯酞， 又名芹菜甲 素， 最早从芹菜籽中被提取发现， 其性状为无色或淡黄色的澄清油状液体， 有特异香气， 在 光照和高温条件下容 易发生降解。 丁苯酞的结构如下： 。 [0003]丁苯酞的常见合成工艺主 要为如专利CN101962374A所公开的路线： 。 [0004]根据丁苯酞的结构性质和主要合成工艺， 丁苯酞的有关物质主要分为丁苯酞类似 物、 降解产 物和工艺杂质， 其中丁苯酞类似物包括烯基苯酞和烷基苯酞， 如烯基苯酞包括甲 烯苯酞、 乙烯苯酞、 丙烯苯酞、 丁烯苯酞、 戊烯苯酞， 烷基苯酞包括苯酞、 甲苯酞、 乙苯酞、 丙 苯酞、 戊苯酞； 降解产物包括羟基丁苯酞、 邻戊烯苯甲酸； 而工艺杂质包括反应中间体邻戊 酰基苯甲酸， 以及开环中间体发生副反应的产物， 如邻苯二甲酸单丁酯、 邻苯二甲酸二丁 酯、 1,2‑二戊酰基苯等。 丁苯酞的类似物大部 分能够依靠工艺技术除去， 而降解杂质和工艺 杂质则成为产品质量控制的重点， 尤其丁苯酞的主要降解杂质羟基丁苯酞和合成中间体邻 戊酰基苯 甲酸。 目前 的现有技术还没有报道有效的具备同时检测上述杂质的检测方法。 因 此， 本领域急需有效检测丁苯酞及其各类杂质的检测方法， 以实现产品质量的精准控制。 [0005]丁苯酞的国家药品标准 （WS1 ‑(X‑124）‑2005Z） 记 载了一种高效液相色谱 法检测有 关物质和 含量， 以甲醇 ‑水(65： 35)为流动相， 检测 波长280nm； 但该方法无法有效检测降解 杂质。 专利CN110108818A的实施例1公开了一种高效液相色谱法同时检测羟基丁苯酞、 丁烯 苯酞和丙 苯酞等多种杂质， 但不适合检测工艺杂质如1,2 ‑二戊酰基苯等。 文章名称为 《反相 高效液相色谱法检测丁苯酞原料药中的杂质》 （doi： 10.16155/j.0254 ‑1793.2020.07.16） 中记载了一种反相高效液相色谱法， 能同时检测羟基丁苯酞和丙苯酞等杂质， 但无法检测 烯基苯酞类杂质如丁烯苯酞。 [0006]因此， 开发可靠 的同时兼顾检测降解杂质、 丁苯酞类似物杂质以及工艺中间体等 杂质的有关物质检测方法， 提高丁苯酞产品的质量研究准确性， 提升产品安全可靠性， 意义 重大。说　明　书 1/12 页 3 CN 115469039 A 3